营养肉汤稀释法不适合缓释性银抗菌剂MIC测试

 

一、理论计算

《2002消毒技术规范》附录中提供的营养肉汤配方如下：

8.营养肉汤培养基

蛋白胨                                      10g  

牛肉膏                                      5g 

氯化钠                                      5g 

蒸馏水                                      1000ml

将各成分溶解于蒸馏水中，调  pH 至 7.2～7.4，分装，于 121℃ 压力蒸汽灭菌 20min备用。

其中NaCl的含量为5g/L。转换为摩尔浓度为0.08547mol/L。

其中的Cl^-离子会跟银离子（Ag⁺）生成氯化银（AgCl）沉淀。

AgCl的溶度积常数为Ksp（AgCl）=1.8*10^-10

以此计算：

在所给定的NaCl浓度（5g/L）下，溶液中可以存在的游离银离子（Ag⁺）的浓度为：

[Ag⁺]=Ksp（AgCl）/[NaCl]= 1.8*10^-10/0.08547=0.21*10^-8mol/L=0.227*10^-6g/L=0.227ug/L（约

为0.227PPb）。

这个值是远低于资料所报道的10ppb左右的银离子MIC值的。如果排除掉接触杀菌的因素，用营养肉汤法根本就测不出抗菌剂的正常MIC。或者说测出来的结果是抗菌剂没有杀菌作用。

 

假定Ag⁺的MIC在5ppb，则允许的NaCl浓度为：227mg/L<<5g/L（肉汤中的浓度）.

 

二、试验验证：

 

采用去离子水和5g/L的NaCl水溶液浸泡来对比对银离子的沉淀情况：

1.采用我公司自制1226-3粉，配500ppm悬液，浸泡相同时间（48小时以上）

结果：去离子水样 Ag+ 浓度大于1ppm

      NaCl水溶液样：测不到Ag+ 。

另：1226-3粉 250mg/L悬液，24小时浸泡后，银离子浓度大于1mg/L（1ppm）。大于资料报道的MBC（Ag⁺）=0.5mg/L。

 

2.日本701S粉，配500ppm悬液，浸泡相同时间（48小时以上）

 

结果：去离子水样：Ag+浓度远远大于1ppm

      NaCl水溶液样：测不到Ag⁺ 。

3.1226-3粉，NaCl肉汤稀释测试：   MIC=3000mg/L（1000mg/L）；

无NaCl 肉汤稀释测试：MIC=300mg/L。

从以上的理论计算及试验验证来看，缓释性银抗菌剂的MIC值采用营养肉汤法来测，会导致极大的偏差，或者说是错误的测试方法。